细胞实验把多个视野当独立样本，n怎样改写？

细胞实验每组只做三次独立培养，却从每次培养拍十个视野，图注写“n=30”。若处理是在每次培养或培养孔整体施加，同一培养中的十个视野共享细胞来源、培养条件和处理批次，不能当成十次独立实验。投稿时应把重复培养、孔、图像和单细胞测量的层级写出来，再说明统计检验用哪个层级。

从处理分配追到显微图

方法段说明细胞来自几个独立培养批次、每次如何接种、处理是按皿还是按孔分配，以及每个培养单位采了多少视野。若同一批细胞分装到多个孔，多个孔是否能代表独立生物重复，取决于研究问题和独立制备、处理的过程，不能只凭孔数下结论。图像采集规则、选视野方式和每个视野细胞数也应记录。数据表至少保留批次号、孔号、图像号和单细胞号，使读者能看出哪些测量共享上层来源。

自拟例子中，三天分别培养一次细胞，每次对照和处理各一个培养孔，每孔拍十个视野，每视野计数约50个细胞。处理效果若要推广到独立培养重复，就应以三天独立实验为核心重复，而不是把三十个视野或上千个细胞当成三十或更多独立培养。可先求每次培养的组内汇总，再比较三次独立实验；若用层级模型，也要说明批次、孔和视野如何纳入。只给一个极小P值而不展示三次培养各自的方向与变异，无法判断重复性。

让图注同时交代测量量和推断量

散点图可以显示所有单细胞测量，但应以颜色或形状标识独立培养批次，并在图注写清n代表批次还是细胞。每个批次采集视野数不一样时，说明是否先在批次内汇总，以免视野多的一次实验支配总体。某个视野因失焦剔除，应记录规则和数目；不能只在处理组剔除低信号视野。若真正的研究对象只是当前这一个细胞皿内部的细胞差异，推论范围也应限定在该皿，不能推广到独立培养的总体效果。

关于细胞和动物实验中n的原始方法论文区分生物单位、实验单位和观察单位，指出把相关观察当作独立重复会夸大证据。细胞生物学数据可视化的原始论文也倡议同时显示单细胞点与独立实验汇总。它们不是规定所有细胞实验固定做三次，而是要求n与想推广的单位一致。

投稿前核对图注中的n=30究竟指三次培养各十个视野，还是三十次独立培养。若只是前者，就把层级写成“三次独立培养、每次十个视野”，并重新检查统计方法。图上三十个视野点很密，仍可能只来自三次独立培养。

参考信息：细胞和动物实验n的原始方法论文；细胞生物学重复性图示方法论文。