代谢组学的混合质控样本，采集顺序与漂移怎样交代？

非靶向代谢组学结果若只写“每批设有质控样本”，读者很难判断仪器信号是否随进样顺序漂移，以及后续校正是否有依据。混合质控通常由研究样本的一部分汇集而成，重复进样可观察本批次的分析波动。代谢组学质量管理建议强调，作者应报告质控样本是什么、用于什么目的以及接受标准。投稿时要把混合质控的制备、插入顺序和信号处理连成一条可复核记录。

先写清质控样本从哪里来

说明是否从全部研究样本等量取样混合，还是只覆盖某些组别；若样本量或基质不同，也要说明混合策略。若使用外部参考材料，它与本研究混合质控承担的作用不同，不能笼统统称“QC”。记录混合、分装、保存和进样次数，避免一个批次用早期混合物、另一个批次用后来新配的混合物，却仍当作完全同一参照。若某些低丰度特征在混合质控中本来不可测，就不要拿这些特征的质控波动推断其全部研究样本中的稳定性。

进样顺序应能复原：每批次的开始、结束和研究样本之间，混合质控插在什么位置，是否有系统适用性样本和空白，研究组样本是否打乱或分层随机。方法文献给出过“起始、周期性、末尾”的示例，但具体间隔要依据研究设计和仪器稳定性确定，不能把别人的固定次数当统一标准。保留实际运行序列表，包括意外中断、重进样和维护后重新平衡；只写计划顺序不能解释真实数据中的突变。

漂移图和校正方法要有对应关系

用混合质控的重复测量检查信号随进样次序的变化，报告所用指标、特征筛选阈值以及校正前后情况。不同代谢特征可能呈上升、下降或非线性变化，不能凭总离子流一条曲线就断言所有特征都稳定。若做基于质控的漂移校正，写出算法、软件版本、拟合范围及批次边界，并检查是否把研究组真实差异一并抹平。若混合质控的进样点太少或集中在某一时段，可能不足以支撑整批漂移曲线，应说明这一限制，不能机械套用校正。

还应报告质控样本在主成分图等结果中的表现，但“质控聚得很紧”不能替代逐特征质量检查。某些代谢物可能在QC中稳定，另一些则波动很大；筛掉后者会改变最终分析特征数。正文或补充表至少给出质控特征总数、依据阈值保留数，以及最终进入差异分析的数量，并说明缺失值如何处理。Nature Methods的代谢组学报告指南指出，混合质控可评估并校正本研究的进样顺序与批次效应，但不能自动当作跨研究通用的参考材料。

提交前随机选一个差异特征，从结果图回看它在所有混合质控进样中的原始强度、校正曲线和是否被剔除；再选一个被剔除特征核对原因。把实际序列表、质控样本制备记录和校正参数一起存档。编辑可据此判断组间差异是否可能受进样顺序影响，而不只依据“质控良好”的一句概括。

参考信息：代谢组学质量管理与混合质控使用指南；《Nature Methods》质谱代谢组学报告研究。